Подробная информация по анализу дополнительное изготовление 5 микропрепаратов
Чтобы получить точные результаты, рекомендуется соблюдать несколько правил:
- Пациенту специальной подготовки не требуется.
- Необходимо предоставить парафиновый блок с материалом, из которого будут изготовлены микропрепараты.
- Желательно приложить копию гистологического заключения и, при необходимости, указания врача о цели изготовления стекол (например, для ИГХ, пересмотра, архивирования и пр.).
- Материал должен быть правильно упакован и защищён от повреждений при транспортировке.
Дополнительные срезы, гистологические стёкла, микропрепараты, гистологические препараты, срезы из блока, подготовка материала для ИГХ, повторная микротомия, дополнительные исследования.
- Необходимость проведения дополнительных иммуногистохимических, молекулярных или других специальных исследований
- Пересмотр материала в другой лаборатории или консилиуме
- Уточнение или подтверждение диагноза
- Подготовка образцов для клинических или научных целей
- Архивирование материала по медицинским или юридическим причинам
Что влияет на результат
- Состояние парафиновых блоков. Если блоки хранились в тепле, пересохли или потрескались, срезы получаются рваными, с дырами. Качественный препарат можно сделать только из целого, плотного блока без пустот.
- Толщина среза. Слишком тонкий срез (меньше 2 мкм) рвётся при переносе на стекло, слишком толстый (больше 5 мкм) затемняет детали клеток. Идеальная толщина — 3–4 мкм, тогда ядра и цитоплазма видны чётко.
- Острота ножа микротома. Тупой нож оставляет поперечные полосы, сминает ткань и рвёт срез. Лезвие нужно менять часто, иначе каждый следующий препарат будет хуже предыдущего.
- Температура водяной бани. На слишком горячей воде срез расправляется быстро, но может лопнуть; на холодной — не расправится и останутся складки. Обычно выставляют 40–45°C, но важно следить за точностью.
- Окраска гематоксилином и эозином. Старые или истощённые красители дают бледную картину, а избыточное окрашивание — тёмную. Время окрашивания и pH растворов критичны для контраста между ядром и цитоплазмой.
- Опыт лаборанта. Перенос среза на стекло, расправление складок, удаление пузырьков — ручные операции. Неаккуратное движение оставляет дефекты, которые уже не исправить. Практика решает.
- Качество реактивов и воды. Грязные красители, пыльная вода на бане или непрофильтрованные растворы дают осадок на стекле. Его можно спутать с микробами или пигментом, что ведёт к ошибке.
- Сушка и монтаж препарата. Если стекло недосушили перед накрытием покровным стеклом, под ним остаётся вода, и препарат мутнеет. Готовые стёкла должны храниться при +4°C в темноте, иначе окраска выцветает.
Расшифровка результатов
Дополнительное изготовление пяти микропрепаратов требуется, когда предыдущие срезы оказались неудачными или нужно больше стёкол для разных окрасок. Врач первым делом проверяет, пригоден ли препарат для диагностики: нет ли разрывов, складок, пузырей, достаточно ли контрастно окрашены ядра и цитоплазма. После этого он переходит к описанию патологии. Ниже — критерии качества, по которым оценивают готовый препарат.
| Показатель | Норма / критерий качества | Дефект — возможные причины | Влияние на диагностику |
|---|---|---|---|
| Целостность среза | Ровный срез без разрывов и складок | Разрывы — тупой нож, слишком тонкий или перегретый срез. Складки — неаккуратный перенос, холодная вода на бане. | Разрывы и складки могут скрыть очаг опухоли или воспаления, имитировать атипию. Пузыри мешают оценке. |
| Окраска ядер и цитоплазмы | Ядра синие, цитоплазма розовая, чёткий контраст | Бледная окраска — старый гематоксилин, короткое время. Избыточная — долгая экспозиция, щелочной гематоксилин. | Слабое окрашивание не даёт увидеть структуру хроматина, избыточное — маскирует ядрышки. Обе ситуации ведут к ошибкам. |
| Фон и чистота препарата | Светлый фон, нет осадка и посторонних частиц | Осадок красителя — грязные растворы, плохая фильтрация. Пыль — нарушение условий хранения. | Посторонние частицы имитируют микроорганизмы или пигмент, приводя к ложноположительному диагнозу. |
| Прозрачность после монтажа | Препарат прозрачный, без мутных участков | Мутность — неполное обезвоживание, попадание воды под покровное стекло, некачественная среда. | Мутные участки рассеивают свет, не позволяя рассмотреть мелкие структуры: мембраны, ядрышки, включения. |
Что назначают вместе с этим исследованием?
Иммуногистохимическое исследование, HER2 neu
Код по МЗ РФ: A08.30.013.001 (п. 804н)
Проводится для оценки экспрессии рецептора HER2 в опухолевых клетках, что помогает в диагностике и прогнозировании реакции на таргетную терапию, особенно при раке молочной железы
Иммуногистохимическое исследование, PD-L1
Код по МЗ РФ: A08.30.039.004 (п. 804н)
Проводится для оценки экспрессии белка PD-L1 на опухолевых и иммунных клетках, что помогает определить возможность применения иммуннотерапии при различных видах рака
