Подробная информация по анализу ИГХ исследование (5 антител)
Чтобы получить точные результаты, рекомендуется соблюдать несколько правил:
- Пациенту специальная подготовка не требуется.
- Необходимо предоставить в лабораторию парафиновый блок или ранее подготовленные гистологические стекла.
- Желательно приложить гистологическое заключение, направление врача и краткую клиническую информацию.
- Перечень антител должен быть согласован с лечащим врачом или патологом, в зависимости от диагностических целей.
ИГХ, иммуногистохимия, ИГХ-исследование, тканевое окрашивание, диагностика опухолей, экспрессия белков, маркеры пролиферации, дифференцировки, опухолевые маркеры, иммуномаркеры, фенотипирование, морфологическое уточнение.
- Определение типа и подтипа опухоли.
- Дифференциация между доброкачественным и злокачественным процессом.
- Подбор целевой терапии, включая гормонотерапию и иммунотерапию.
- Диагностика метастатических очагов неясного происхождения.
- Выявление прогностических и диагностических маркеров.
- Уточнение воспалительного или аутоиммунного характера поражения.
Что влияет на результат
- Фиксация биоптата. Формалин должен проникать равномерно. Если ткань фиксировали меньше 6 часов или, наоборот, более 48, часть антигенов разрушается, и окрашивание ослабевает. Оптимальное время — 24 часа при комнатной температуре.
- Толщина среза. Парафиновые срезы толще 5 мкм мешают антителам проникать к антигенам, а слишком тонкие (менее 2 мкм) дают слабый сигнал. Стандарт — 3–4 мкм.
- Температурная демаскировка. Перед окрашиванием срезы нагревают в цитратном или трис-буфере. Недогревание оставляет антигены скрытыми, перегревание разрушает их. Каждое антитело требует своей температуры и времени.
- Контрольные образцы. В каждой постановке обязательно окрашивают срез с заведомо положительной тканью. Если контроль не дал реакции, все результаты пациента считаются недействительными.
- Качество антител. Клоны антител различаются по чувствительности. Просроченный реагент или неправильное разведение дают ложноположительное фоновое окрашивание либо полное отсутствие сигнала.
- Хранение готовых стёкол. Накрытые покровным стеклом препараты держат при +4°C в темноте. Через 2–3 недели интенсивность окрашивания начинает снижаться, особенно для ядерных маркеров.
- Опыт специалиста. Полуколичественная оценка (процент позитивных клеток и интенсивность) субъективна. Врач, регулярно работающий с ИГХ, точнее отличит истинное мембранное окрашивание от цитоплазматического артефакта.
- Автоматическая станция. Ручная постановка чаще даёт неравномерность окраски, чем автоматическая. Однако даже на станции важны калибровка и чистота дозаторов.
Расшифровка результатов
ИГХ с пятью антителами обычно используют для определения гистогенеза опухоли, особенно при метастазе с неизвестным первичным очагом. Каждый маркер имеет специфическую локализацию окрашивания: мембранную, ядерную или цитоплазматическую. Результат выражают как положительный или отрицательный, иногда с указанием процента клеток. Ниже приведены типичные комбинации и их значение.
| Маркер | Локализация окрашивания | Положительный результат — заболевания | Отрицательный результат — заболевания |
|---|---|---|---|
| TTF-1 | Ядро | Аденокарцинома лёгкого, мелкоклеточный рак лёгкого, рак щитовидной железы. Позволяет подтвердить лёгочное происхождение метастаза. | Плоскоклеточный рак лёгкого, рак молочной железы, колоректальный рак, почечно-клеточный рак. Отсутствие TTF-1 при опухоли лёгкого не исключает немелкоклеточный рак. |
| CDX2 | Ядро | Колоректальный рак, рак желудка, рак тонкой кишки, муцинозная карцинома. Часто сочетается с CK20+/CK7-. | Рак лёгкого, молочной железы, яичников, почек, щитовидной железы. Отрицательный CDX2 при CK20+ указывает на другую первичную локализацию. |
| p63 | Ядро | Плоскоклеточные карциномы (лёгкого, головы и шеи, пищевода, шейки матки), базальные клетки. Помогает отличить плоскоклеточный рак от аденокарциномы. | Аденокарциномы, нейроэндокринные опухоли, лимфомы. Отрицательный p63 при CK7+ делает плоскоклеточную дифференцировку маловероятной. |
| ER (эстрогеновый рецептор) | Ядро | Рак молочной железы (люминальные типы), рак эндометрия, часть аденокарцином яичников. Показание к гормонотерапии. | Трижды негативный рак молочной железы, рак лёгкого, толстой кишки. Отсутствие ER исключает чувствительность к тамоксифену. |
| Ki-67 | Ядро пролиферирующих клеток | Высокий индекс пролиферации (например, >20%) при агрессивных опухолях: лимфомы высокой степени, рак молочной железы с высоким grade, нейроэндокринные карциномы. Отражает скорость роста. | Низкий индекс (<5–10%) при медленно растущих опухолях: карциноиды, лимфомы низкой степени злокачественности. Ассоциирован с лучшим прогнозом. |
Что назначают вместе с этим исследованием?
Иммуногистохимическое исследование, HER2 neu
Код по МЗ РФ: A08.30.013.001 (п. 804н)
Проводится для оценки экспрессии рецептора HER2 в опухолевых клетках, что помогает в диагностике и прогнозировании реакции на таргетную терапию, особенно при раке молочной железы
Иммуногистохимическое исследование, PD-L1
Код по МЗ РФ: A08.30.039.004 (п. 804н)
Проводится для оценки экспрессии белка PD-L1 на опухолевых и иммунных клетках, что помогает определить возможность применения иммуннотерапии при различных видах рака
