Подробная информация по анализу ИГХ исследование (2 антитела), Hadassah
Чтобы получить точные результаты, рекомендуется соблюдать несколько правил:
- Специальной подготовки со стороны пациента не требуется.
- Для исследования необходимо предоставить парафиновый блок или готовый гистологический срез.
- Рекомендуется приложить гистологическое заключение и/или направление с указанием требуемых маркеров.
- Материал должен быть упакован надёжно для транспортировки, особенно при пересылке из другой клиники или страны.
Иммуногистохимия, IHC, ИГХ-анализ, тканевая диагностика, экспрессия белков, маркёры опухоли, онкомаркеры, рецепторный статус, гормонозависимые опухоли, Ki-67, HER2, ER, PR, молекулярная верификация.
- Подтверждение диагноза злокачественного или доброкачественного образования
- Определение гормонального или рецепторного статуса (например, ER и PR)
- Выявление уровня пролиферативной активности опухоли (например, по Ki-67)
- Уточнение диагноза при наличии неоднозначных морфологических данных
- Подготовка к таргетной или гормональной терапии
- Повторное исследование при расхождении заключений между лабораториями
Что влияет на результат
- Фиксация ткани. От скорости и равномерности проникновения формалина зависит сохранность белков-антигенов. Если биоптат фиксировали меньше 6 часов или дольше 48, часть белков разрушается или маскируется, и антитела не дают чёткого окрашивания.
- Толщина среза. Парафиновый срез должен быть 3–4 мкм. Более толстый мешает антителам проникать, из-за чего окрашивание становится пятнистым и трудным для оценки. Слишком тонкий срез даёт слабый сигнал.
- Демаскировка антигенов. Перед нанесением антител срезы нагревают в специальном буфере, чтобы «открыть» белки. Недостаточная демаскировка приводит к ложноотрицательному результату, избыточная — к фоновому свечению, которое мешает трактовке.
- Качество антител. Разные клоны антител имеют разную чувствительность. Просроченный или неправильно разведённый реагент либо не связывается с мишенью, либо даёт неспецифическую реакцию. Ошибка на этом этапе делает анализ бесполезным.
- Контрольные образцы. В каждой постановке обязательно окрашивают ткань с заведомо известным результатом. Если контроль не сработал, результаты всех пациентских образцов недействительны и требуют повторной постановки.
- Хранение готовых стёкол. Препараты держат при +4°C в темноте. Через 2–3 недели интенсивность окрашивания начинает снижаться, особенно для ядерных маркеров. Это может исказить полуколичественную оценку.
- Опыт морфолога. Оценка иммуногистохимии субъективна: нужно отличить истинное специфическое окрашивание от артефакта. Только специалист, регулярно работающий с ИГХ, может правильно интерпретировать препарат.
- Автоматизация процесса. Ручная окраска чаще даёт неравномерность, чем автоматическая станция. Однако даже на станции важна калибровка и чистота дозаторов, иначе возможны ошибки.
Расшифровка результатов
Иммуногистохимическое исследование с двумя антителами обычно используется для уточнения гистогенеза опухоли или оценки прогностических факторов. Ниже приведены две наиболее распространённые комбинации антител, применяемые в лаборатории Hadassah.
| Маркер | Локализация окрашивания | Положительный результат — заболевания и значение | Отрицательный результат — заболевания и значение |
|---|---|---|---|
| CK7 | Цитоплазма эпителиальных клеток | Аденокарциномы лёгкого, молочной железы, яичников, эндометрия, щитовидной железы, холангиокарцинома. Помогает подтвердить первичный очаг при метастазе. | Плоскоклеточные карциномы, гепатоцеллюлярная карцинома, почечно-клеточный рак, колоректальный рак. Отсутствие CK7 характерно для опухолей нижних отделов ЖКТ. |
| CK20 | Цитоплазма эпителиальных клеток | Колоректальный рак, рак желудка, опухоли Меркеля, переходноклеточный рак. Часто сочетается с отрицательным CK7, что указывает на нижние отделы ЖКТ. | Рак лёгкого, молочной железы, яичников, почек, щитовидной железы. Отрицательный CK20 при положительном CK7 характерен для этих локализаций. |
Что назначают вместе с этим исследованием?
ИГХ опухоли молочной железы (PR/ER/Кi67/Her2 neu), Hadassah
Код по МЗ РФ: A08.20.009.006 (п. 804н)
Анализ используется для оценки экспрессии рецепторов прогестерона (PR), эстрогена (ER), индекса пролиферации Ki67 и протеина Her2 neu в опухолях молочной железы
ИГХ опухоли предстательной железы (Ck5/P63/AMACR), Hadassah
Код по МЗ РФ: A08.21.001.006 (п. 804н)
Анализ используется для оценки экспрессии маркеров Ck5, P63 и AMACR в опухолях предстательной железы с целью уточнения диагноза и определения типа опухоли
